步骤 1:样品剪切碎片
操作内容:使用手柄和子将固态样品(如肉类/组织样品)切成细小的碎片。
分析说明:这是固体样品前处理的基础步骤。通过增加样品的诱导,可以使后续加入的萃取试剂充分循环样品,大大提高目标残留物(兽药)的提取效率和充分程度。
步骤2:称取1克样品
操作内容:将剪碎的样品转移至离心管中,使用电子天平精准称取1.00g样品。
分析解说:保证浓度的精确计量。定量分析必须建立在精密的基质质量基础上,控制在1.00g可以为后续的浓度计算提供标准的参考基准。
步骤3:加入前处理试剂
操作内容:用移液枪吸取指定体积的前处理试剂(如缓冲液或蛋白质沉淀剂)加入装有样品的离心管中。
分析解说:前处理试剂通常用于调节溶液的pH值、破坏目标物与蛋白质的结合,或者沉淀基质中的高分子(如蛋白质),从而释放被锁定的兽药分子。
步骤4:加入萃取溶剂
操作内容:向离心管中加入稀释溶剂(通常为有机溶剂,如乙苯或甲醇等)。
分析解说:基于“相似相溶”原理,提取溶剂能够将基质样品中的兽药成分高效率地溶解并提取出来,实现目标物与大部分不可溶固体基质的分离。
步骤5:吸入净化管中的粉末并振荡30秒
操作内容:将吸附混合物吸附含有吸附吸附剂(如C18、PSA或无水硫酸镁等吸附吸附粉末)的净化管中,盖紧胶塞后手动或机械振荡30。
分析说明:此步骤为典型的分散固相萃取(QuEChERS)净化法。净化粉末可以吸附色素、脂肪、吸附等危害,或者吸收水分,进一步影响背景,提高检测信噪比。
步骤6:分层后取2mL离心管上清液
操作内容:待液体静置分层(或静置/离心)后,用移液器精密吸取上层离心液,转移至新的2mL离心管中。
分析说明:将已净化的目标物的上清液与底部的吸附剂粉末及离心沉淀彻底分离,防止再次溶解回液体中。
步骤7:再次加入前处理试剂并振荡30秒
操作内容:向盛有上清液的2mL离心管中再次用移液器加入桌面前处理试剂,盖紧后混匀30秒。
分析解说:二次调节配与反应,进一步稳定目标物的化学状态,优化溶液环境(如调整离子强度或pH值),导致适应持续的显着色/拉曼光谱或检测反应。
步骤8:增强试剂A使用前摇匀并加入检测瓶中
操作内容:将增强试剂A瓶充分摇匀,用移液枪吸取增强试剂A加入专门的检测微孔瓶(小玻璃瓶)中。
分析解说:增强试剂(如纳米金/银溶胶等拉曼表面增强剂)中的颗粒极易沉降,因此使用前必须“摇匀”以确保浓度均匀。将增强试剂移入检测瓶,为构建光学/胶体增强检测做好准备。
步骤9:进样(去除液提取)
操作内容:用移液枪吸取步骤7中处理好的提取液,用均衡器加入到设备增强试剂A的检测瓶中。
分析解说:使含有兽药的目的提取液与增强试剂充分接触混匀,开启增效吸附或显色反应。
步骤10:加入增强试剂B并振荡摇匀
操作内容:向检测瓶中继续加入增强试剂B(通常为凝集剂或激发试剂),然后手动盖上瓶盖,轻轻振荡摇匀。
分析解说:增强试剂B可以促使增强试剂A与目标分子局部微区(“热点”)形成倍放大检测信号(如SERS表面增强拉曼信号或比色信号),大幅启动检测。
步骤11:放入检测池中检测
操作内容:将混匀后的检测瓶放入便携式检测仪器的检测池/检测槽中,盖上遮光盖,启动仪器进行光谱或光度检测。
分析解说:前期处理彻底完成,进入信号采集阶段。通过仪器对光信号的读取与数据库对比,快速出具兽药残留的定量/定量检测结果。


