请于-20℃条件下保存，有效期12个月

【产品说明】

物种鉴定系列基于独特的恒温荧光检测技术，可针对食品、饲料等样品中动物源性成分的特异核酸片段进行扩增，仪器实时监测扩增过程中的荧光信号变化，自动判读结果。本产品用于猪源性成分的检测，检出限为0.5%。

【产品组成(48测试)】

【适用仪器】

台式多重微流控PCR等荧光PCR仪。

【自备耗材和仪器】

①灭菌1.5mL或2.0mL离心管；

②灭菌0.2mL PCR管或八联管；

③冰盒；

④移液器(0.5-10μL,10-100μL,100-1000μL)及配套灭菌吸头；

⑤离心机；

⑥涡旋混匀器；

⑦金属浴

【注意事项】

1.本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。

1)第一区：试剂准备区。

2)第二区：样本制备区。

3)第三区：扩增及产物分析区。

★分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。

2.实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。

3.严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。

4.反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心30秒，并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。

5.反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。

6.不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。

【样品处理】

参照《SB/T 10923-2012肉及肉制品中动物源性成分的测定实时荧光PCR法》或其他标准处理样品，制备的样本保存待用。

①样品的采集和制备是动物源性鉴别的重要步骤，为防止交叉污染，应使用一次性消耗品，研钵应经160℃干烤2h,其他不宜干烤或高压处理的器皿应使用1%次氯酸钠溶液浸泡。

②取样应尽量采取肌肉组织，对于同一批样品，应多点采集合并后，作为一份样品进行均质，提取DNA。

③采样过程应快速完成，将采取的样品迅速放入组织搅碎机中进行均质成糜状，充分混匀，取0.1g充分混匀的样品，采用液氮研磨或均质器均质。

详细步骤请按照标准操作。

【实验操作】

将试剂完全解冻，各组分离心30s。

1.试剂配制(试剂准备区，放置于冰盒中进行):

若有N个待检样品，则参照下表，按照N+2个数量计算各组分用量(N个待检样品+1个阴性对照NG+1个阳性对照PG),将混合液置于0.6ml或者1.5ml离心管中，涡旋混匀，离心30秒，分装于0.2ml PCR管中，并向每管加入1滴C-I(约20μl)。

2.模板制备(样本制备区)

建议使用试剂配套动物源性成分DNA提取系列产品，具体过程详见产品说明书。

3.添加模板(样本制备区，放置于冰盒中进行)

向步骤1中已含有混合液的PCR管中分别加入2μl模板，顺序为待测样品模板、阳性对照PG-猪源-I(阴性对照管无需额外加入模板),离心30秒，立即进行扩增反应。 

4.扩增反应(扩增及产物分析区)

①恒温仪器63℃条件下反应45min。待仪器升温至63℃后，新建程序，设置实验名称及反应时间，将步骤3中离心后的PCR反应管放入恒温荧光分子检测仪，点击开始检测。

【结果判定】

①仪器自动判定结果，若显示“阳性”,则样品中含有猪源性成分；若显示“阴性”,则样品中不含有猪源性成分或含量低于检测限。

②在荧光定量PCR仪上，根据有无“S”型扩增曲线判定结果。若有“S”型扩增曲线，则样品中含有猪源性成分；若无“S”型扩增曲线，则样品中不含有猪源性成分或含量低于检测限。

★ NG反应管结果显示“阴性”,PG反应管结果显示“阳性”,此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。